 |
上海莼試生物技術(shù)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價(jià)格，ELISA試劑盒報(bào)價(jià) |
會(huì)員.png)
聯(lián)系電話
13585831301
公司信息
- 聯(lián)系人：
- 李小姐
- 電話：
- 021-59541103、021-60443211
- 手機(jī)：
- 13585831301
- 售后電話：
- 13585831301
- 傳真：
- 021-60443211
- 地址：
- 上海市嘉定區(qū)嘉羅公路1661號(hào)
- 郵編：
如何正確設(shè)置免疫組化對(duì)照
2026-1-14 閱讀(9)
免疫組化對(duì)照設(shè)置是確保結(jié)果可靠性的核心關(guān)鍵要點(diǎn)：
一、四大核心對(duì)照設(shè)置
?陽(yáng)性對(duì)照?
?作用?：驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)體系有效性，確保染色過(guò)程正確進(jìn)行。
?示例?：檢測(cè)乳腺癌HER2蛋白時(shí)，使用已知HER2高表達(dá)的乳腺癌組織。
?意義?：若陽(yáng)性對(duì)照未顯色，提示實(shí)驗(yàn)步驟（如抗體失效、操作失誤）存在問(wèn)題。
?陰性對(duì)照?
?作用?：排除非特異性染色或背景干擾。
?示例?：檢測(cè)肺癌PD-L1時(shí)，使用正常肺組織或省略一抗作為陰性對(duì)照。
?意義?：若陰性對(duì)照顯色，可能因抗體交叉反應(yīng)、封閉不充分或二抗問(wèn)題。
?空白對(duì)照?
?操作?：省略一抗，僅用二抗和顯色劑。
?意義?：檢測(cè)二抗非特異性結(jié)合或背景染色。
?示例?：僅使用基礎(chǔ)試劑（如一抗稀釋液），檢測(cè)內(nèi)源性干擾因素（如內(nèi)源酶活性）。
?替代對(duì)照?
?定義?：用同種屬無(wú)關(guān)抗體替代一抗。
?作用?：驗(yàn)證一抗特異性。
?示例?：一抗為單抗的mouse anti rat CD11b，clone OX-42 purified IgG，其同型對(duì)照為purified mouse IgG2a。
二、操作要點(diǎn)
?陽(yáng)性對(duì)照?：需使用已知表達(dá)目標(biāo)抗原的組織或細(xì)胞。
?陰性對(duì)照?：需使用不表達(dá)目標(biāo)抗原的樣本，或用無(wú)關(guān)抗體替代一抗。
?空白對(duì)照?：需省略一抗，僅用二抗和顯色劑。
?同型對(duì)照?：需嚴(yán)格匹配一抗的種屬、Ig亞型、標(biāo)記物及濃度等參數(shù)。
?內(nèi)對(duì)照?：需在同一組織切片中存在已知不表達(dá)目標(biāo)抗原的細(xì)胞。
三、對(duì)照設(shè)置的實(shí)際意義
?提高診斷準(zhǔn)確性?：避免將非特異性染色誤判為陽(yáng)性。
?優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件?：幫助調(diào)整抗體濃度、孵育時(shí)間等參數(shù)。
?符合科研規(guī)范?：論文發(fā)表或臨床報(bào)告中，完整的對(duì)照數(shù)據(jù)是結(jié)果有效性的必要支撐。
四、對(duì)照實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)
?陽(yáng)性對(duì)照?：需使用已知表達(dá)目標(biāo)抗原的組織或細(xì)胞。
?陰性對(duì)照?：需使用不表達(dá)目標(biāo)抗原的樣本，或用無(wú)關(guān)抗體替代一抗。
?空白對(duì)照?：需省略一抗，僅用二抗和顯色劑。
?同型對(duì)照?：需嚴(yán)格匹配一抗的種屬、Ig亞型、標(biāo)記物及濃度等參數(shù)。
?內(nèi)對(duì)照?：需在同一組織切片中存在已知不表達(dá)目標(biāo)抗原的細(xì)胞。
?總結(jié)?：免疫組化對(duì)照設(shè)置需綜合考慮抗體特異性、染色系統(tǒng)可靠性及背景干擾，通過(guò)多維度對(duì)照確保結(jié)果真實(shí)性。
